An toàn đặc hiệu
Tính an toàn đặc hiệu của vắc xin bạch
hầu – uốn ván – ho gà toàn tế bào được
kiểm tra trên mẫu bán thành phẩm cuối cùng hay vắc
xin thành phẩm khi cần thiết và được
tiến hành như sau:
An toàn
đặc hiệu đối với thành phần bạch
hầu và uốn ván
Chọn 5
chuột lang khoẻ mạnh, cùng giới (nếu khác giới
phải nhốt riêng lồng), có trọng lượng 250g -
350 g, chưa sử dụng vào bất cứ thử
nghiệm nào trước đó; tiêm dưới da cho
mỗi chuột lang ít nhất 5 liều đơn vắc
xin cho người (liều vắc xin như ghi trên nhãn). Theo
dõi chuột hàng ngày và cân trọng lượng chuột hàng
tuần trong 3 tuần (đối với thành phần uốn
ván) và 6 tuần (đối với thành phần bạch hầu).
Nếu có chuột chết
phải mổ để kiểm tra phủ tạng về
dấu hiệu nhiễm độc bạch hầu
(tuyến thượng thận đỏ).
Nếu có hơn một chuột lang chết trong
thử nghiệm lần 1, phải nhắc lại thử
nghiệm; nếu
lần thử nghiệm nhắc lại không có chuột nào
có biểu hiện nhiễm độc do độc tố
bạch hầu hay uốn ván và có ít nhất 2/3 số chuột
thử nghiệm sống sót sau khoảng thời gian theo dõi
như quy định (3 tuần đối với vắc
xin uốn ván và 6 tuần đối với vắc xin bạch
hầu) thì loạt vắc xin DTwP đó đạt yêu cầu
về an toàn đặc hiệu đối với thành phần
bạch hầu và uốn ván.
-Nếu có hơn
một chuột lang bị chết vì những nguyên nhân không
đặc hiệu và thử nghiệm không có giá trị
(invalid test), phải nhắc lại thử nghiệm với
số lượng động vật thí nghiệm và mẫu
thử bằng lần 1; nếu vẫn có hơn một
chuột lang chết ở lần thử nghiệm thứ
2 thì loạt vắc xin không đạt về an toàn đặc
hiệu đối với thành phần bạch hầu và uốn
ván, phải huỷ bỏ.
- Nếu thử
nghiệm lần 1 không đạt yêu cầu nhưng thử
nghiệm có giá trị (valid test), phải nhắc lại thử
nghiệm với số lượng mẫu thử và số
lượng chuột lang gấp đôi. Nếu thử nghiệm
nhắc lại vẫn có quá 1/3 số chuột chết do bất
kỳ lý do nào thì loạt vắc xin DTwP này sẽ phải huỷ
bỏ.
Tiêu chuẩn chấp thuận
Vắc xin đạt yêu cầu
nếu không có chuột lang nào chỉ ra dấu hiệu
liệt do uốn ván hoặc triệu chứng nhiễm độc
bạch hầu và ít nhất 80% chuột sống sót, khoẻ
mạnh và lên cân trong thời gian 6 tuần (đối
với thành phần bạch hầu) hoặc 3 tuần (đối
với thành phần uốn ván).
An toàn đặc hiệu đối với
thành phần ho gà toàn tế bào (wP)
Dùng
20 chuột nhắt trắng có trọng lượng 14 -16 g,
cùng giới (nếu có cả 2 giới, cần phân chia
đều trong các nhóm) cho mỗi mẫu vắc xin thử
và cho nhóm chứng.
Chuột
được ăn uống đầy đủ
trước khi tiêm 1 giờ và trong suốt thời gian thí
nghiệm. Tổng trọng lượng của từng nhóm
chuột được xác định ngay trước lúc
tiêm. Mỗi chuột được tiêm vào ổ bụng 0,5
ml dung dịch chứa tối thiểu nửa liều
đơn vắc xin cho người. Nhóm chứng
được tiêm 0,5 ml nước muối sinh lý (tốt
nhất chứa cùng hàm lượng chất bảo quản
như có trong dung dịch tiêm cho nhóm thí nghiệm). Tổng
trọng lượng các nhóm chuột được xác
định lại vào 72 giờ và 7 ngày sau tiêm.
Tiêu chuẩn chấp
thuận:
Loạt
vắc xin đạt yêu cầu nếu đạt cả 3
tiêu chuẩn sau:
- Sau 72
giờ tổng trọng lượng chuột của
mỗi nhóm không ít hơn trước tiêm.
-
Sau 7 ngày trọng lượng trung bình mỗi chuột không
ít hơn 60% so với nhóm chứng.
- Chuột
chết không quá 5%.
Nếu
thử nghiệm lần 1 không đạt một trong 3 tiêu
chuẩn nêu trên phải nhắc lại thử nghiệm:
- Nếu thử
nghiệm lần 1 không có giá trị (invalid test): Chỉ cần
nhắc lại thử nghiệm với số lượng
chuột và số lượng mẫu bằng lần 1.
- Nếu thử
nghiệm lần 1 có giá trị (valid test): Phải nhắc lại
thử nghiệm với số lượng chuột
nhắt trắng và số lượng mẫu gấp
đôi so với lần 1.
Kết
quả của lần kiểm tra nhắc lại, nếu
đạt yêu cầu 3 tiêu chuẩn nêu trên và giá trị trung
bình của 2 lần thử nghiệm (về % tăng
trọng chuột của nhóm vắc xin thử nghiệm so
với nhóm chứng sau 7 ngày theo dõi) đạt yêu cầu
thì loạt vắc xin đó mới được coi là
đạt yêu cầu về an toàn đặc hiệu ho gà.
Nếu ở lần kiểm tra nhắc lại không
đạt yêu cầu thì loạt vắc xin đó không đạt
yêu cầu an toàn đặc hiệu thành phần ho gà và phải
bị huỷ bỏ.
An
toàn không đặc hiệu ( Độc tính bất
thường)
Thử
nghiệm được tiến hành trên chuột nhắt
trắng và chuột lang khoẻ mạnh không tiêm bất
cứ gì trước khi thử nghiệm. Tiêm vào ổ
bụng cho 5 chuột nhắt trắng có trọng
lượng 17 - 22g/con, mỗi con một nửa liều
tiêm cho người; 2 chuột lang có trọng lượng
250 - 350 g/con, mỗi con một
liều tiêm cho người nhưng không quá 1 ml/con.
Theo
dõi tình trạng sức khoẻ và cân trọng lượng
chuột hàng ngày.
Tiêu chuẩn chấp
thuận:
Vắc
xin được coi là không có độc tính bất
thường nếu tất cả các động vật
thí nghiệm sống khoẻ mạnh và lên cân trong thời
gian ít nhất 7 ngày và không có dấu hiệu nhiễm
độc.
Nếu
thử nghiệm lần 1 không đạt yêu cầu nêu trên,
phải nhắc lại thử nghiệm. Thử nghiệm
nhắc lại nếu đạt yêu cầu thì loạt vắc
xin đó được coi là đạt an toàn không đặc
hiệu; nếu không đạt yêu cầu thì loạt vắc
xin đó bị coi là không đạt an toàn không đặc
hiệu và phải huỷ bỏ.
Đối
với thử nghiệm nhắc lại:
-
Nếu thử nghiệm lần 1 không đạt yêu cầu
nhưng thử nghiệm có giá trị (valid test): phải nhắc
lại thử nghiệm với số lượng mẫu
và số lượng chuột gấp đôi lần 1.
-
Nếu thử nghiệm lần 1 không đạt yêu cầu
nhưng thử nghiệm không có giá trị (invalid test): chỉ
cần nhắc lại thử nghiệm với số lượng
mẫu và số lượng chuột bằng lần 1.